Porta-copos Interneuron 6

A distribuição dos interneurons que expressam EGFP do promotor do receptor 5HT3 (Tg (Htr3a-EGFP) DH30Gsat, www.gensat.org) no hipocampo dorsal colabelled para o receptor do cannabinoid CB1 (red) e counterstained com o DAPI (azul) para mostrar as camadas da pilha. A expressão de EGFP foi amplificada com a galinha anti-GFP (Abcam, 1:2000); os corpos e as fibras de pilha estão atuais durante todo todas as camadas do hipocampo mas enriquecidas no moleculare do lacunosum do hilus e do estrato (veja imagens associadas). O immunoreactivity CB1 (1:200 polyclonal do coelho L15, K. Mackie) é proeminente nos terminais das pilhas da cesta que synapsing na camada piramidal da pilha. CB1 é enriquecido igualmente nos axónio com intensidades distintas na camada molecular interna e exterior do giro dentate. O immunoreactivity dos CB está igualmente atual no radiatum do estrato e no moleculare do lacunosum do estrato. A seção (40 um) foi montada com Fluoromount G e imaged com um 5X, 0,15 objetivos do NA Achroplan em um microscópio de Zeiss Axiovert. AF568 era excited em 562/40 de nanômetro e de emissão recolhidos em 624/40 de nanômetro com filtros de Semrock e em uma única banda dichroic (530-585 nanômetro refletido, 601-800 nanômetro transmitido). AF488 era excited em 482/35 de nanômetro e de emissão recolhidos em 536/40 de nanômetro com filtros de Semrock e em uma única banda dichroic (446-499 nanômetro refletido, 513-735 nanômetro transmitido). DAPI era excited em 350/50 de nanômetro e de emissão recolhidos em 460/50 de nanômetro com um CLP400 dichroic (croma). As únicas imagens foram capturadas para cada canal usando um SR. CCD de Zeiss Axiocam e pseudo-coloridas usando Axiovision. A subtração linear do fundo foi usada na imagem apresentada. Veja Davis e Puhl 2011 (identificação 21305052 de Pubmed) para um protocolo de mancha detalhado. Esta imagem é parte de uma série que caracteriza a expressão de EGFP do promotor 5HT3 durante todo o cérebro.